Contrairement aux autres chauves-souris, les roussettes ne vivent pas dans des grottes et n'ont pas d'écholocation, mais elles ont des sens de la vue et de l'ouïe très développés. Ce sont de grands frugivores. Ils vivent dans des colonies très hiérarchisées pouvant accueillir jusqu'à un millier d'individus, où les mâles dominants occupent les meilleures positions, situées dans les parties supérieures d'un grand arbre. Ils passent la journée à dormir, la tête en bas, les ailes repliées autour de leur corps. Parfois, ils s’éventent pour maintenir une température corporelle adéquate.

Au crépuscule, ils quittent l'arbre à la recherche de fruits pour se nourrir, puis retournent au perchoir pour digérer la nourriture et se rendormir. Ils ingèrent le jus du fruit, rejetant la pulpe et les graines. Ce sont donc d’importants disperseurs de graines. L'accouplement a lieu entre juillet et octobre et les petits naissent généralement entre février et mai. Les femelles s'éloignent du groupe pour mettre bas, et cacheront leurs petits entre leurs ailes pendant les 5 premiers mois de leur vie. À cet âge, ils se sépareront du côté de leur mère et commenceront à chercher de la nourriture par eux-mêmes. Les jeunes deviennent sexuellement matures à l'âge d'un an et demi.